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分子杂交仪的原理和特点

2022-06-14 16:40:13

分子杂交仪的原理和特点

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    分子杂交仪又被叫做分子杂交箱或者分子杂交炉。由于实验的需求不一样,因此有不同规格型号的分子杂交仪可供选择。它是现代实验室采用杂交技术的理想设备,能够将塑料杂交袋和水浴摇床替代掉,从而使杂交袋破损带来的污染危险得以避免。杂交炉的特点分别为较快的升温速度,独特的炉内空气循环装置设计以及准确的微机控温。

    按照碱基互补配对原则,使用标记的已知DNA或RNA片段(探针)在一定条件下对样本中是否有待测的核酸序列进行检测的技术,即为核酸分子杂交技术。

    在生理条件下,DNA呈现稳定的双链螺旋结构。在体外,当存在如温度超过65℃、含胺或极端pH等变性因素时,DNA分子内部的氢键断裂,解离成两条单链DNA,这种现象叫做变性。在将变性因素消除以后,单链DNA通过碱基互补使稳定的双链螺旋结构重新结合成,该过程叫做复性或退火。

    在复性过程中,如果有和样本核酸某部分序列高度同源或相同的寡核苷酸(一般为17~45个碱基)或外源性单链DNA片段,那么两者能够通过互补碱基使杂交体形成,也就是双链DNA分子,该过程叫做杂交。在复性的DNA中加入一段已知的DNA片段,如果有双链分子结合成,那么表明有已知的DNA序列存在于样本中。

    核酸分子杂交不但能够在DNA与DNA之间发生,还能够在在RNA与RNA或者RNA与DNA之间发生,分别生成DNA-DNA、 RNA-RNA或 RNA-DNA的双链结构的杂交体。

分子杂交仪

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