电压：每个微生物都有特定的电压参数。有些细胞在电穿孔过程中死亡。如果场强太高或太低，则转化效率低。植入细胞的预期存活率在20％到80％之间。大肠杆菌的电穿孔需要大约5毫秒的脉冲，场强在12千伏/厘米和19千伏/厘米之间。为了优化条件，你应该检查不同电压下的转换效率。

细胞：一般来说，细胞处于早期到中期对数期时转化效率高。不同的生长条件可以提高转化。如果杀死太多细胞，须优化菌株的电穿孔条件，须检查DNA制备和有毒或有机物质的细胞电穿孔后，细胞（尤其是大肠杆菌）须立即转移到富培养基中才能获得良好的结果。即使是完成这一步骤的微小延迟也会导致转化效率显著减低。

DNA：电穿孔前应检查所用DNA的数量和质量。DNA浓缩或降解不当会导致转化效率低下。在制备过程之前，须从DNA制备中去除可能对细胞产生毒性影响的盐和其他成分。威尼德生物科技（北京）有限公司（www.bio-vleader.com），研发生产的双波全能型电穿孔仪Gene Pulser X2通过高强度的电场作用，瞬时提高细胞膜的通透性，从而吸收周围介质中的外源分子。这种技术将核苷酸、DNA与RNA、蛋白、糖类、染料以及病毒颗粒等导入原核和真核细胞内。电转化相对于其它物理和化学转化方法，是一种有价值和有效的替代方法。广泛用于植物、动物和微生物的各类细胞电穿孔。

DNA制剂应在电穿孔前一分钟内加入细胞。细胞制备中的DNA酶会降解DNA，从而导致转化效率低下。

温度：电穿孔反应杯应在电穿孔前冷却至0°C-4°C。这比室温下电穿孔反应杯产生更好的结果。如果使用冷冻细胞，解冻后应立即进行电穿孔。冷冻细胞在-80°C的10％-15％甘油中多可储存6-12个月。变换期间的偏差电压：施加在电穿孔反应杯（act）上的电压与设定电压（set）相差很大

电阻过低有几个原因：

A: 将细胞洗涤并重新悬浮在离子强度过高的缓冲液中。

B: 在制备过程中，细胞没有得到充分清洁。洗涤不足后，携带的生长培养基残留

C: 物会留下不需要的盐。

D: 溶解的细胞正在准备中。它们有助于降低介质的阻力。

F: DNA制剂中的盐浓度太高。